小鼠破骨細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)過程中的威脅就是細(xì)胞污染，凡是混入細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境中，對(duì)細(xì)胞生存有害的成分和造成細(xì)胞不純的異物都應(yīng)視為污染。細(xì)胞一旦遭到污染，所有的實(shí)驗(yàn)結(jié)果都會(huì)變得毫無意義。因此，及時(shí)檢測并鑒定出所培養(yǎng)的細(xì)胞是否被污染至關(guān)重要。

　　

　　細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室要求保持無菌操作，避免微生物及其他有害因素的影響。細(xì)胞培養(yǎng)室要相對(duì)封閉，潔凈無塵，設(shè)有緩沖間。

　　

　　對(duì)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行定期清掃、紫外消毒是避免細(xì)胞培養(yǎng)過程中由于實(shí)驗(yàn)室環(huán)境引起細(xì)胞污染的主要措施，此外，實(shí)驗(yàn)室內(nèi)不要放太多雜物，保持實(shí)驗(yàn)室干燥，有利于降低因?qū)嶒?yàn)室條件引起的細(xì)胞污染率。

　　

　　小鼠破骨細(xì)胞培養(yǎng)過程中實(shí)驗(yàn)人員是否操作規(guī)范，是否嚴(yán)格遵守?zé)o菌工作流程，是細(xì)胞污染的一個(gè)主要因素。操作人員進(jìn)培養(yǎng)室前，必須先洗手，在緩沖間換穿專用實(shí)驗(yàn)服和拖鞋，嚴(yán)禁在實(shí)驗(yàn)進(jìn)行時(shí)頻繁出入培養(yǎng)室。實(shí)驗(yàn)后應(yīng)將實(shí)驗(yàn)產(chǎn)生的廢物和廢液及時(shí)清理出培養(yǎng)室，并清潔無菌工作臺(tái)。

　　

　　細(xì)菌和真菌污染很容易被檢測，因?yàn)槭艿郊?xì)菌、真菌污染的細(xì)胞，培養(yǎng)過程中培養(yǎng)基會(huì)出現(xiàn)肉眼可見的明顯特征。細(xì)菌污染會(huì)導(dǎo)致培養(yǎng)基出現(xiàn)渾濁、顏色改變以及pH值急劇變化，受污染的貼壁細(xì)胞在幾天內(nèi)會(huì)逐漸脫壁死亡。真菌污染后的細(xì)胞生長速度變慢，培養(yǎng)基中會(huì)漂浮白色、淺黃色或黑色的小點(diǎn)。

　　

　　因此，通過觀察培養(yǎng)基的顏色、漂浮物、pH值或在顯微鏡下觀察小鼠破骨細(xì)胞及其生長狀態(tài)，從而能初步判斷該細(xì)胞是否受細(xì)菌、真菌污染。

　　

　　也可以使用培養(yǎng)檢測法：將細(xì)胞培養(yǎng)物在各類培養(yǎng)基中適溫培養(yǎng)若干天后，觀察是否有細(xì)菌或真菌生長。